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高通量的96孔PCR板和8聯管的使用和選擇注意事項
更新時(shi)間:2023-10-09瀏覽:921次

  高通(tong)量的(de)96孔PCR板和8聯管是在聚合酶鏈式反應(ying)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)中,主(zhu)要作為參與擴增反應(ying)的(de)引(yin)物、Taq DNA聚合酶、dNTP、模板核(he)酸、Mg、緩沖(chong)液(ye)等(deng)的(de)承載物。醫療(liao)級聚丙烯(xi)(PP)材(cai)質因(yin)其的(de)純凈度和穩(wen)定性,能更(geng)好適應(ying)PCR反應(ying)過程中反復高低溫設定,并且能夠實現高溫高壓滅菌操作,常常被用于PCR耗(hao)材(cai)的(de)生(sheng)產。隨著熒光定量PCR技術(shu)的(de)普及,該技術(shu)被廣泛用于遺傳、生(sheng)化(hua)、免疫、醫藥等(deng)領域,不(bu)僅應(ying)用于基(ji)因(yin)分(fen)離、克(ke)隆和核(he)酸序列分(fen)析等(deng)基(ji)礎研究,還可用于疾病(bing)的(de)診斷或任何(he)有DNA,RNA的(de)研究領域。

  如何正確使用(yong)96孔PCR孔板(ban)

  


  PCR板有(you)透明和乳白色可選,其中(zhong)乳白色更適合用于頂部采集熒(ying)光(guang)信號的(de)新(xin)型(xing)熒(ying)光(guang)定(ding)(ding)量PCR儀(如(ru)伯樂CFX系列,ABI 7500fast 以上型(xing)號, Roche 480系列),但如(ru)果(guo)熒(ying)光(guang)定(ding)(ding)量PCR儀是底部光(guang)源(yuan)的(de),則應選擇(ze)透明的(de)。

  PCR板(ban)根據裙(qun)(qun)(qun)(qun)邊(bian)(bian)設(she)計(ji)又(you)可(ke)分為(wei)無裙(qun)(qun)(qun)(qun)邊(bian)(bian)、半裙(qun)(qun)(qun)(qun)邊(bian)(bian)和(he)全裙(qun)(qun)(qun)(qun)邊(bian)(bian)三種設(she)計(ji)模式,不同廠家的熒光定量PCR儀會設(she)計(ji)不同的切角或邊(bian)(bian)緣凸起(qi),請選擇適合該PCR儀的板(ban)子。

  PCR板(ban)(ban)(ban)又分(fen)100ul體積(矮板(ban)(ban)(ban))和200ul體積(高(gao)板(ban)(ban)(ban)),根據(ju)機(ji)型的不同(tong)選(xuan)擇(ze),選(xuan)擇(ze)不同(tong)高(gao)度孔(kong)板(ban)(ban)(ban),避免高(gao)度錯誤對機(ji)器(qi)造成破壞和加(jia)熱不均(jun)導致數(shu)據(ju)失真(zhen)。

  當使用96孔(kong)板做熒光定量(liang)PCR實驗(yan)的時候,推(tui)薦使用光學膜代來密封反應孔(kong)。

  加(jia)樣后會(hui)在管壁上飛濺一些小(xiao)液滴(di),另外反應體系內也會(hui)有一些氣泡(pao),需要離心(xin)(xin)去(qu)掉掛壁液滴(di)和氣泡(pao)。請使用(yong)專用(yong)的微孔板離心(xin)(xin)機解(jie)決上述問題。

  PCR板(ban)屬(shu)于一(yi)次性消耗(hao)品(pin),生(sheng)產一(yi)次成(cheng)型,不(bu)建議剪開使用容易(yi)造成(cheng)實(shi)驗(yan)(yan)誤差增加(jia),不(bu)能清洗或部分(fen)重復利用。不(bu)要為了節省(sheng)一(yi)點小錢(qian),而(er)給實(shi)驗(yan)(yan)帶(dai)來(lai)后續分(fen)析(xi)上(shang)的困擾。樣本(ben)量少,用8聯管做實(shi)驗(yan)(yan)又該注(zhu)意哪些呢?

  


  8聯管也分乳白(bai)和透明兩(liang)種,選擇方(fang)式和孔板一樣,根據PCR儀的(de)熒光信(xin)號采(cai)集方(fang)式決(jue)定。

  8聯管(guan)同(tong)樣也有0.1ml(矮(ai)管(guan))和0.2ml(高(gao)管(guan)),根據PCR儀的加熱(re)模(mo)塊體積確定。

  8聯管的(de)蓋(gai)(gai)子一般有光學(xue)(xue)平蓋(gai)(gai)和凸(tu)型圓(yuan)(yuan)蓋(gai)(gai)之分,光學(xue)(xue)平蓋(gai)(gai)適用(yong)(yong)于熒光定量PCR,圓(yuan)(yuan)蓋(gai)(gai)適用(yong)(yong)于普(pu)通PCR。



  使用單管或8聯管做(zuo)實驗,并且樣(yang)(yang)(yang)本(ben)(ben)數(shu)量不多的(de)(de)(de)時(shi)候(hou),建(jian)議(yi)在(zai)樣(yang)(yang)(yang)品加(jia)熱塊(kuai)(TRAY)上對稱地安(an)放樣(yang)(yang)(yang)品,最好(hao)是縱(zong)向放置,并且優先放在(zai)第6列或第7列,然后(hou)逐漸向兩邊(bian)放置。這樣(yang)(yang)(yang)做(zuo)的(de)(de)(de)好(hao)處是熱蓋壓下來(lai)的(de)(de)(de)時(shi)候(hou)不至于發生傾斜(xie),各個(ge)反應(ying)管的(de)(de)(de)受力和受熱都比較(jiao)均勻,提高(gao)孔與孔之間的(de)(de)(de)數(shu)據精密性。也可以(yi)在(zai)加(jia)熱模塊(kuai)四角(jiao)的(de)(de)(de)位置,放置4個(ge)單管平衡熱蓋壓力,避免擴增少量樣(yang)(yang)(yang)本(ben)(ben)時(shi)出現管子變形的(de)(de)(de)情(qing)況(kuang)。

  管(guan)蓋(gai)(gai)沒有蓋(gai)(gai)好造成(cheng)(cheng)(cheng)PCR反(fan)(fan)(fan)應液熱(re)蒸(zheng)發,影(ying)響反(fan)(fan)(fan)應溫度(du)的(de)準確控制及反(fan)(fan)(fan)應也(ye)各成(cheng)(cheng)(cheng)份(fen)的(de)濃(nong)度(du),同(tong)時也(ye)成(cheng)(cheng)(cheng)為一個(ge)污(wu)染(ran)(ran)源(yuan)。不(bu)但會(hui)因壓(ya)蓋(gai)(gai)時由(you)于(yu)粗心(xin)或者用(yong)力不(bu)均致使部分蓋(gai)(gai)子變形,而且還會(hui)造成(cheng)(cheng)(cheng)樣品的(de)交(jiao)叉(cha)污(wu)染(ran)(ran),所以我們推薦用(yong)獨立管(guan)蓋(gai)(gai)的(de)8聯管(guan),每管(guan)蓋(gai)(gai)一體(ti),確保樣本獨立反(fan)(fan)(fan)應,避免交(jiao)叉(cha)污(wu)染(ran)(ran)。

  熒光定量(liang)(liang)PCR耗材 本生(sheng)是(shi)實(shi)驗(yan)室(shi)本生(sheng)一直視質量(liang)(liang)控制為企業的(de)生(sheng)命(ming),追求企業競爭力的(de)不斷提升。公司在經營中(zhong)始終秉承(cheng):遵紀守法(fa),嚴于律己,寬仁以待,敢于承(cheng)擔的(de)企業精神作(zuo)為標準,以過(guo)硬的(de)質量(liang)(liang)和(he)優(you)良的(de)服(fu)務來維護和(he)拓展市場,較大(da)限(xian)度的(de)滿足客戶的(de)需求。與客戶的(de)共(gong)贏,是(shi)我們的(de)發展目(mu)標。本生(sheng)!您信(xin)任(ren)的(de)合(he)作(zuo)伙伴。我們愿與您真誠合(he)作(zuo),共(gong)創美(mei)好的(de)未(wei)來。


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