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人胎盤生長因子(PLGF)酶聯免疫分析試劑盒

  • 產品型號:
  • 產品(pin)時間:2023-02-14
  • 簡(jian)要描述:人胎盤生長因子(PLGF)酶聯免疫分析試劑盒天津本生生物供應ELISA試劑盒種屬全,實驗室耗材種類全,PCR耗材,離心管,進口吸頭等等。
  • 產品簡介

  人胎盤生長因子(PLGF)酶聯免疫分析試劑盒


  僅供研究使用。

  檢測范(fan)圍: 96T3 ng/L -120 ng/L

  使用(yong)目的(de)(de)(de):本(ben)(ben)試劑盒(he)用(yong)于(yu)測(ce)(ce)定(ding)人(ren)血清(qing),血漿及相關(guan)液體(ti)(ti)(ti)樣本(ben)(ben)中胎(tai)(tai)(tai)盤(pan)(pan)生(sheng)(sheng)長因(yin)(yin)子(zi)(zi)(zi)(PLGF)含量。實驗(yan)原理本(ben)(ben)試劑盒(he)應用(yong)雙抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)夾心法測(ce)(ce)定(ding)標(biao)(biao)本(ben)(ben)中人(ren)胎(tai)(tai)(tai)盤(pan)(pan)生(sheng)(sheng)長因(yin)(yin)子(zi)(zi)(zi)(PLGF)水(shui)平。用(yong)純化(hua)的(de)(de)(de)人(ren)胎(tai)(tai)(tai)盤(pan)(pan)生(sheng)(sheng)長因(yin)(yin)子(zi)(zi)(zi)(PLGF)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)包(bao)被微(wei)孔板,制成(cheng)固相抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti),往包(bao)被單抗(kang)(kang)(kang)(kang)的(de)(de)(de)微(wei)孔中依次加入胎(tai)(tai)(tai)盤(pan)(pan)生(sheng)(sheng)長因(yin)(yin)子(zi)(zi)(zi)(PLGF),再與HRP標(biao)(biao)記的(de)(de)(de)胎(tai)(tai)(tai)盤(pan)(pan)生(sheng)(sheng)長因(yin)(yin)子(zi)(zi)(zi)(PLGF)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)結合,形成(cheng)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)-抗(kang)(kang)(kang)(kang)原-酶(mei)(mei)標(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)復合物,經過洗滌后加底物TMB顯色(se)。TMB在HRP酶(mei)(mei)的(de)(de)(de)催化(hua)下(xia)(xia)轉化(hua)成(cheng)藍色(se),并在酸(suan)的(de)(de)(de)作用(yong)下(xia)(xia)轉化(hua)成(cheng)最終的(de)(de)(de)黃(huang)色(se)。顏色(se)的(de)(de)(de)深淺(qian)和樣品(pin)中的(de)(de)(de)胎(tai)(tai)(tai)盤(pan)(pan)生(sheng)(sheng)長因(yin)(yin)子(zi)(zi)(zi)(PLGF)呈正相關(guan)。用(yong)酶(mei)(mei)標(biao)(biao)儀在450nm波長下(xia)(xia)測(ce)(ce)定(ding)吸光(guang)度(OD值),通過標(biao)(biao)準曲線計(ji)算樣品(pin)中人(ren)胎(tai)(tai)(tai)盤(pan)(pan)生(sheng)(sheng)長因(yin)(yin)子(zi)(zi)(zi)(PLGF)濃(nong)度。

  試劑盒組成

  130倍濃縮洗(xi)滌液(ye)20ml×1瓶7終止液(ye)

  6ml×1瓶(ping)2酶(mei)標試劑

  6ml×1瓶(ping)8標準品(1600μg/mL)

  0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔(kong)×8條(tiao)9標準品稀釋液

  1.5ml×1瓶4樣品(pin)稀釋液

  6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑(ji)A液

  6ml×1瓶11封(feng)板膜2張(zhang) 6顯色劑(ji)B液

  6ml×1/瓶12密封袋1個(ge)

  標本要求

  1.標(biao)本采集(ji)后(hou)盡早(zao)進(jin)行(xing)提取(qu),提取(qu)按相關(guan)文獻進(jin)行(xing),提取(qu)后(hou)應盡s快進(jin)行(xing)實驗。若不(bu)能(neng)馬(ma)上(shang)進(jin)行(xing)試驗,可將(jiang)標(biao)本放于(yu)-20℃保存(cun),但應避(bi)免反復凍融

  2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑(yi)制辣(la)根過氧化物酶(mei)的(HRP)活性。

  操作步驟

  1.標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)(pin)(pin)(pin)(pin)的(de)(de)(de)稀(xi)(xi)(xi)釋:本試(shi)劑(ji)盒提供(gong)原倍標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)(pin)(pin)(pin)(pin)一支,用戶可按照下列圖表在小試(shi)管中進行稀(xi)(xi)(xi)釋。800μg/mL5號(hao)(hao)標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)(pin)(pin)(pin)(pin)150μl的(de)(de)(de)原倍標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)(pin)(pin)(pin)(pin)加(jia)入(ru)150μl標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)(pin)(pin)(pin)(pin)稀(xi)(xi)(xi)釋液(ye)(ye)400μg/mL4號(hao)(hao)標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)(pin)(pin)(pin)(pin)150μl的(de)(de)(de)5號(hao)(hao)標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)(pin)(pin)(pin)(pin)加(jia)入(ru)150μl標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)(pin)(pin)(pin)(pin)稀(xi)(xi)(xi)釋液(ye)(ye)200μg/mL3號(hao)(hao)標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)(pin)(pin)(pin)(pin)150μl的(de)(de)(de)4號(hao)(hao)標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)(pin)(pin)(pin)(pin)加(jia)入(ru)150μl標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)(pin)(pin)(pin)(pin)稀(xi)(xi)(xi)釋液(ye)(ye)100μg/mL2號(hao)(hao)標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)(pin)(pin)(pin)(pin)150μl的(de)(de)(de)3號(hao)(hao)標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)(pin)(pin)(pin)(pin)加(jia)入(ru)150μl標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)(pin)(pin)(pin)(pin)稀(xi)(xi)(xi)釋液(ye)(ye)50μg/mL1號(hao)(hao)標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)(pin)(pin)(pin)(pin)150μl的(de)(de)(de)2號(hao)(hao)標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)(pin)(pin)(pin)(pin)加(jia)入(ru)150μl標(biao)(biao)(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)(pin)(pin)(pin)(pin)稀(xi)(xi)(xi)釋液(ye)(ye)

  2.加(jia)(jia)樣(yang)(yang)(yang)(yang):分別(bie)設(she)空(kong)白(bai)孔(kong)(kong)(空(kong)白(bai)對照孔(kong)(kong)不加(jia)(jia)樣(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)及酶(mei)標試劑(ji),其余各步操作相同)、標準(zhun)孔(kong)(kong)、待測(ce)樣(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)孔(kong)(kong)。在酶(mei)標包被板上標準(zhun)品(pin)準(zhun)確(que)加(jia)(jia)樣(yang)(yang)(yang)(yang)50μl,待測(ce)樣(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)孔(kong)(kong)中先(xian)加(jia)(jia)樣(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)稀釋液40μl,然后再加(jia)(jia)待測(ce)樣(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)10μl(樣(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)最終稀釋度為5倍)。加(jia)(jia)樣(yang)(yang)(yang)(yang)將樣(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)加(jia)(jia)于酶(mei)標板孔(kong)(kong)底部,盡(jin)量不觸及孔(kong)(kong)壁,輕輕晃(huang)動混(hun)勻。

  3.溫育:用封(feng)板膜(mo)封(feng)板后(hou)置37℃溫育30分鐘(zhong)。

  4.配(pei)液:將(jiang)30倍濃縮洗滌液用(yong)蒸餾水30倍稀釋后(hou)備(bei)用(yong)

  5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體(ti),甩干,每孔(kong)加滿洗滌液,靜置30秒(miao)后棄去,如(ru)此重復5次,拍(pai)干。

  6.加酶:每孔(kong)加入酶標試劑50μl,空(kong)白(bai)孔(kong)除外。

  7.溫育:操(cao)作(zuo)同3。

  8.洗滌:操作同5。

  9.顯(xian)色(se):每孔(kong)先(xian)加(jia)入顯(xian)色(se)劑(ji)A50μl,再加(jia)入顯(xian)色(se)劑(ji)B50μl,輕輕震(zhen)蕩混勻,37℃避(bi)光顯(xian)色(se)10分(fen)鐘.

  10.終止:每孔加終止液50μl,終止反(fan)應(此(ci)時(shi)藍色立轉(zhuan)黃色)。

  11.測定:以空(kong)白孔(kong)調零,450nm波長依序測量各(ge)孔(kong)的吸(xi)光度(OD值)。 測定應在加終(zhong)止液后15分鐘(zhong)以內進行。

  操作程序總結:

操作程序總結:.png

  計(ji)(ji)算 以標(biao)(biao)準(zhun)物的濃度(du)(du)為橫坐(zuo)(zuo)標(biao)(biao),OD值(zhi)為縱坐(zuo)(zuo)標(biao)(biao),在(zai)坐(zuo)(zuo)標(biao)(biao)紙上繪(hui)出(chu)標(biao)(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)(xian)(xian),根據樣(yang)品(pin)的OD值(zhi)由標(biao)(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)(xian)(xian)查(cha)出(chu)相應的濃度(du)(du);再乘(cheng)以稀(xi)(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu);或用標(biao)(biao)準(zhun)物的濃度(du)(du)與(yu)OD值(zhi)計(ji)(ji)算出(chu)標(biao)(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)(xian)(xian)的直線(xian)(xian)(xian)回歸(gui)方(fang)程式,將(jiang)樣(yang)品(pin)的OD值(zhi)代入方(fang)程式,計(ji)(ji)算出(chu)樣(yang)品(pin)濃度(du)(du),再乘(cheng)以稀(xi)(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu),即為樣(yang)品(pin)的實際(ji)濃度(du)(du)。

  人胎盤生長因子(PLGF)酶聯免疫分析試劑盒 注意事項

  1.試劑盒從冷藏環境中取出應在(zai)室溫平衡15-30分鐘后(hou)方可使用(yong),酶標包被板開封后(hou)如(ru)未用(yong)完(wan),板條應裝(zhuang)入密(mi)封袋中保存。

  2.濃洗滌液(ye)可能會有結(jie)晶析出(chu),稀釋時可在水浴中加溫助(zhu)溶,洗滌時不影響(xiang)結(jie)果。

  3.各步加(jia)樣(yang)(yang)均(jun)應使用加(jia)樣(yang)(yang)器,并經常(chang)校對其準確性,以避(bi)免試驗誤(wu)差。一次加(jia)樣(yang)(yang)時間最好控制在5分(fen)鐘內(nei),如(ru)標本數量(liang)多(duo),推薦使用排槍加(jia)樣(yang)(yang)。

  4.請每(mei)次(ci)測定的同時(shi)做標準(zhun)曲(qu)線,最好做復孔(kong)。如(ru)標本(ben)中待(dai)測物質含量過高(樣本(ben)OD值大于標準(zhun)品(pin)孔(kong)第一(yi)(yi)孔(kong)的OD值),請先(xian)用樣品(pin)稀釋液稀釋一(yi)(yi)定倍(bei)數(n倍(bei))后(hou)(hou)再測定,計算時(shi)請最后(hou)(hou)乘(cheng)以(yi)總稀釋倍(bei)數(×n×5)。

  5.封板膜只(zhi)限一次性使(shi)用,以避免交叉污染。

  6.底物請避光保(bao)存。

  7.嚴格(ge)按照說明書(shu)的操作進行,試驗結果判(pan)定必須以酶標儀(yi)讀(du)數為準(zhun).

  8.所有樣品,洗滌液和各種廢(fei)棄物(wu)都應按傳染物(wu)處理(li)。

  9.本試劑不同批(pi)號組分不得混用。

  保存條件及(ji)有效期(qi)1.試劑盒保存:2-8℃。2.

  有效期:6個月



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